Resinas de cromatografía
El principio de la cromatografía se basa en 2 fases: la fase móvil que impulsa la muestra y la fase estacionaria que permite su purificación. Las resinas cromatográficas constituyen esta fase estacionaria.
Existen distintos tipos de cromatografía en función del tipo de resina utilizada. Los cuatro tipos principales de cromatografía son la cromatografía de afinidad, la cromatografía de intercambio iónico (IEX), la cromatografía de interacción hidrofóbica (HIC) y la cromatografía de exclusión por tamaño (SEC). La mayoría de los sistemas de purificación requieren el uso de varios de estos tipos de procedimientos cromatográficos para alcanzar la pureza necesaria para las aplicaciones posteriores. La elección del método o métodos cromatográficos más apropiados y el orden de estos métodos es esencial en la optimización de un método de purificación de proteínas.
Tipo de cromatografía | Principio de separación | Interacción | Elución |
Afinidad | Interacción específica | Sin ligando competitivo | Ligando competitivo (específico), ruptura de las interacciones proteína / proteína por cambio de condiciones (no específico). |
Intercambio iónico | Carga superficial neta | Baja fuerza iónica | Alta fuerza iónica, pH creciente (cationes) o decreciente (aniones) |
Interacciones hidrofóbicas | Hidrofobicidad | Alta fuerza iónica | Baja fuerza iónica |
Exclusión por tamaño | Radio hidrodinámico |