Producción de monoclonales de llama
Servicios de construcción y cribado de bibliotecas de anticuerpos de dominio único Llama V
Nuestros procesos optimizados de construcción de bibliotecas y cribado con tecnología de visualización de fagos garantizan el aislamiento satisfactorio de clones de VHH de alta afinidad en poco tiempo.
Ventajas de los anticuerpos de dominio único VHH de llama:
- Los anticuerpos VHH de dominio único sólo tienen 15 kD, frente a los 150 kD de las inmunoglobulinas típicas.
- El menor tamaño de los anticuerpos de dominio único les permite encajar físicamente en epítopos que normalmente no son accesibles a los anticuerpos tradicionales, incluido el sitio activo de muchas enzimas.
- Su menor tamaño también les permite penetrar más rápidamente en los tejidos, incluso atravesar fácilmente la barrera hematoencefálica.
- Los anticuerpos VHH son extremadamente estables y resistentes tanto a la acidez como a la temperatura, e incluso son capaces de plegarse de nuevo en una proteína funcional tras la desnaturalización.
- Los anticuerpos de dominio único tienen una solubilidad muy alta debido a su mayor hidrofobicidad
- Su pequeño tamaño y estabilidad hacen de los anticuerpos VHH candidatos ideales para aplicaciones terapéuticas y de diagnóstico.
Detalles de la producción de anticuerpos de dominio único VHH:
Vacunación de llamas
- Construcción de bibliotecas de visualización de fagos: Controlamos el título antisuero mediante ELISA y recogemos múltiples hemorragias de producción y células PBMC a lo largo de la inmunización. Las células PBMC se conservan en tampón de lisis de ARN en diferentes puntos temporales, para que los repertorios de anticuerpos se conserven a lo largo del proceso de inmunización. Al final del protocolo de inmunización, el cliente puede elegir las PBMC en cualquier momento para construir la biblioteca.
- Cribado de bibliotecas de VHH y determinación de la afinidad: La biblioteca construida se examinará mediante múltiples rondas de unión/selección por afinidad con antígeno. Los clones positivos se identificarán mediante ELISA. Se analizará la secuencia de los genes de estos clones positivos. La afinidad de cada ligando se determinará mediante ELISA. Dependiendo de la complejidad del antígeno, se entregarán de uno a tres clones con la mejor afinidad.
- Purificación de anticuerpos VHH a gran escala: For each positive clone, we will provide ~100ug of purified protein with no extra charge. Additional antibody protein are available at extra cost.
- Biblioteca ingenua de visualización de fagos VHH: Nuestra biblioteca VHH más reciente de llamas no inmunizadas cubre repertorios VHH amplios y diversos que representan más de 2,0x109 células mononucleares periféricas de 20 llamas no inmunizadas. La biblioteca tiene más de 2x109 clones independientes.