Un  fluorimètre  est un instrument sophistiqué conçu pour mesurer la fluorescence émise par un échantillon après qu'il a été excité par une longueur d'onde de lumière spécifique. Cet appareil est essentiel dans divers domaines scientifiques, notamment la biochimie, la surveillance environnementale et le diagnostic médical, où il permet de quantifier la présence et la concentration de molécules fluorescentes, appelées  fluorophores .

Principe de fonctionnement

La fluorescence se produit lorsqu'une substance absorbe la lumière à une longueur d'onde et la réémet à une longueur d'onde plus longue. Un fluorimètre se compose généralement de plusieurs éléments clés :

• Source lumineuse :  Souvent une lampe au xénon ou un laser qui fournit la lumière d'excitation.
• Monochromateurs ou filtres :  ils sélectionnent les longueurs d'onde spécifiques de la lumière utilisée pour l'excitation et l'émission. Les fluorimètres à filtre utilisent des filtres optiques, tandis que les spectrofluoromètres utilisent des monochromateurs pour une plus grande flexibilité dans la sélection des longueurs d'onde.
• Porte-échantillon (cuvette) :  c'est là que l'échantillon est placé pour analyse. Il doit être fabriqué à partir de matériaux qui ne sont pas fluorescents aux longueurs d'onde utilisées.
• Détecteur :  Généralement un tube photomultiplicateur (PMT) ou un dispositif à couplage de charge (CCD), qui mesure l'intensité de la fluorescence émise.

Types de fluorimètres

Il existe deux principaux types de fluoromètres :

• Fluorimètres à filtre :  ils sont généralement moins chers et utilisent des filtres optiques fixes pour sélectionner les longueurs d'onde d'excitation et d'émission. Ils sont plus simples mais offrent une sensibilité et une résolution inférieures à celles des spectrofluoromètres.
• Spectrofluorimètres :  ils utilisent des monochromateurs pour sélectionner les longueurs d'onde, ce qui permet une plus grande flexibilité et une plus grande sensibilité. Ils peuvent être réglés sur une large gamme de longueurs d'onde, ce qui les rend adaptés aux analyses plus complexes.

Applications

Les fluorimètres sont largement utilisés dans :

• Recherche biologique :  pour quantifier les acides nucléiques et les protéines dans des échantillons, souvent à de très faibles concentrations (jusqu'à des parties par billion).
• Surveillance environnementale :  Détecter les polluants ou surveiller les processus biologiques dans les écosystèmes.
• Diagnostic médical :  dans les analyses nécessitant une sensibilité élevée pour détecter des biomolécules spécifiques.
• Applications industrielles :  telles que le contrôle qualité des produits pharmaceutiques et alimentaires.