Kits et colonnes pour la chromatographie échangeuse d'ions
La chromatographie par échange d'ions (IEX) sépare les protéines en fonction de leur charge de surface nette, grâce à des interactions électrostatiques qui se produisent entre les protéines et une phase stationnaire chargée. Deux types d'IEX existent:
- échangeuse d'anions (phase stationnaire chargée positivement qui se lie à des protéines chargées négativement)
- échangeuse de cations (phase stationnaire chargée négativement qui se lie à des protéines chargées positivement)
La chromatographie échangeuse d'ions est couramment utilisée comme une étape intermédiaire dans une méthode de purification des protéines, mais elle peut donner une résolution élevée pour certaines protéines lorsqu'elle est utilisée plus tôt ou plus tard au cours de la purification.
Toutes les protéines présentent une charge nette qui dépend de la composition en acides aminés de la protéine ainsi que des modifications attachées de manière covalente. La charge nette d'une protéine est influencée par le pH du solvant dans lequel elle est dissoute, comme le solvant échange des ions d'hydrogène avec les protéines. Le point isoélectrique (pI) d'une protéine est le pH auquel la protéine n'a pas de charge nette. A un pH supérieur au pI, une protéine aura une charge nette négative, tandis qu'un pH inférieur au pI mènera à une charge nette positive. Ainsi, le pH du solvant peut être ajusté afin de faciliter la liaison à l'IEX ou de promouvoir l'élution d'une protéine liée.
