Lactate déshydrogénase (LDH)
La mort cellulaire ou la cytotoxicité est classiquement évaluée par la quantification des lésions de la membrane plasmique. Les kits de mesure de la cytotoxicité LDH fournissent une méthode rapide et simple pour quantifier la cytotoxicité basée sur la mesure de l'activité de la lactate déshydrogénase (LDH) libérée par les cellules endommagées.
Contrairement à de nombreuses autres enzymes cytoplasmiques qui existent dans de nombreuses cellules soit en faible quantité (phosphatase alcaline et acide par exemple) ou instable, la LDH est une enzyme cytoplasmique stable présente dans toutes les cellules et rapidement libérée dans le surnageant de culture cellulaire après endommagement de la membrane plasmique. L'activité LDH peut être déterminée par une réaction enzymatique couplée: la LDH oxyde le lactate en pyruvate qui réagit ensuite avec le sel de tétrazolium INT pour former du formazan. L'augmentation de la quantité de formazan produite dans le surnageant de culture est directement liée à l'augmentation du nombre de cellules lysées. Le colorant formazan est soluble dans l'eau et peut être détecté par spectrophotomètre à 500 nm.
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