Mix SYBR Green Universel pour RT-qPCR
Les mix pour PCR quantittative SYBR Green universels sont fait pour être utilisés avec tous les types d'appareils qPCR.
Ils sont constitués du mix SYBR Green (contenant une Taq polymérase, les dNTPs, du MgCl2 et du SYBR Green) et 2 colorants ROX différents : High Rox et Low Rox. Il suffit donc d'ajouter le colorant correspondant à l'appareil qPCR que vous voulez utiliser.
L'avantage des mix SYBR Green universels est donc de pouvoir utiliser le même mix pour des appareils différents.
Voici comment sélectionner le colorant ROX approprié pour l'appareil qPCR que vous utilisez :
| Universel | Tous les appareils |
| Sans ROX | Bio-Rad
CFX96, CFX384, iCycler iQ, iQ5, MyiQ, MiniOpticon, Opticon®, Opticon 2,
Chromo4; Cepheid SmartCycler®; Eppendorf Mastercycler® ep realplex, realplex 2 s; Illumina Eco qPCR; Qiagen/Corbett Rotor-Gene® Q, Rotor-Gene® 3000, Rotor-Gene® 6000; Roche Applied Science LightCyclerTM 480; Thermo Scientific PikoReal Cycler. |
| Low ROX | Applied
Biosystems 7500, 7500 Fast, ViiA7; Stratagene MX4000, MX3005P, MX3000P |
| High ROX | Applied
Biosystems 5700, 7000, 7300, 7700, 7900, 7900HT, 7900HT Fast; StepOne, StepOnePlus |
Pour les applications de RT-qPCR, il existe 2 approches : la RT-qPCR en une étape et la RT-qPCR en deux étapes. Chacune de ces méthodes à ses avantages et ses inconvénients. Comme son nom l'indique, la RT-qPCR en une seule étape combine la synthèse de l'ADN complémentaire (ADNc) du premier brin (la transcription inverse, RT) et la PCR quantitative subséquente dans un seul tube de réaction. La RT-qPCR en deux étapes implique deux réactions distinctes, à commencer par la synthèse de l'ADNc du premier brin (transcription inverse - RT), puis l'amplification d'une partie de l'ADNc résultant par PCR quantitative dans un tube séparé.
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RUOCE / IVD
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