Outils de clonage

Le clonage d'ADN ou clonage moléculaire est le processus de fabrication de copies multiples et identiques d'un morceau d'ADN particulier. Le clonage moléculaire utilise généralement des séquences d'ADN provenant de deux organismes différents : l'espèce qui est la source de l'ADN à cloner, et l'espèce qui servira d'hôte vivant pour la réplication de l'ADN recombinant. Les méthodes de clonage moléculaire sont au cœur de nombreux domaines contemporains de la biologie et de la médecine modernes. Dans une procédure typique de clonage d'ADN, le gène ou autre fragment d'ADN d'intérêt est d'abord inséré dans un morceau circulaire d'ADN appelé plasmide. L'insertion est effectuée à l'aide d'enzymes qui "coupent et collent" l'ADN, et elle produit une molécule d'ADN recombinant, ou ADN assemblé à partir de fragments provenant de sources multiples.

Pratiquement toute séquence d'ADN peut être clonée et amplifiée, mais certains facteurs peuvent limiter le succès du processus. Les séquences d'ADN difficiles à cloner sont par exemple les répétitions inversées, les origines de réplication, les centromères et les télomères. Une autre caractéristique qui limite les chances de succès est la grande taille de la séquence d'ADN. Les insertions de plus de 10 kbp ont un succès très limité, mais les bactériophages tels que le bactériophage λ peuvent être modifiés pour insérer avec succès une séquence jusqu'à 40 kbp.