La glucose oxydase (GOx) est une enzyme clé qui catalyse l’oxydation du β-D-glucose en D-glucono-δ-lactone et en peroxyde d’hydrogène, jouant un rôle important dans le métabolisme du glucose et la biologie redox. Les kits de dosage de la glucose oxydase permettent une quantification sensible, rapide et fiable de l’activité de la GOx dans divers échantillons biologiques et industriels.

Rôle biochimique de la glucose oxydase dans le métabolisme intermédiaire

• Oxydation du glucose : La GOx catalyse l’oxydation du glucose, le convertissant en D-glucono-δ-lactone, qui s’hydrolyse spontanément en acide gluconique. Cette réaction aide à réguler la disponibilité du glucose et initie des processus métaboliques en aval.
• Production de peroxyde d’hydrogène : La réaction enzymatique génère du peroxyde d’hydrogène (H₂O₂), une espèce réactive de l’oxygène impliquée dans la signalisation cellulaire et les réponses au stress oxydatif.
• Intégration métabolique : En contrôlant l’oxydation du glucose et les niveaux de H₂O₂, la GOx influence indirectement la glycolyse, la voie des pentoses phosphates et d’autres voies métaboliques, affectant la production d’énergie et l’équilibre redox cellulaire.

Principes des kits de dosage de la glucose oxydase

Les kits de dosage de la glucose oxydase mesurent généralement l’activité de la GOx en se basant sur sa réaction enzymatique avec le glucose et l’oxygène, suivie de la détection du peroxyde d’hydrogène ou de produits associés :

• Réaction enzymatique : β-D-Glucose + O₂ → GOx → D-Glucono-δ-lactone + H₂O₂

• Dosages colorimétriques : Le peroxyde d’hydrogène réagit avec un substrat chromogène en présence de peroxydase pour produire un composé coloré mesurable par absorbance (généralement entre 550–570 nm).
• Dosages fluorométriques : Le peroxyde d’hydrogène ou les intermédiaires de réaction génèrent des signaux fluorescents détectés par des lecteurs de microplaques.
• Format du test : La plupart des kits utilisent des plaques de 96 puits pour le criblage à haut débit, avec des protocoles simples impliquant l’incubation des échantillons avec les réactifs, suivie d’une mesure par absorbance ou fluorescence.

Caractéristiques clés des kits de dosage de la glucose oxydase

• Sensibilité : Limites de détection aussi faibles que 0,002 U/L pour les tests fluorométriques et 0,01 U/mL pour les tests colorimétriques.
• Types d’échantillons : Compatibles avec des préparations enzymatiques, des lysats cellulaires ou tissulaires, des fluides biologiques, des bouillons de fermentation et des produits alimentaires.
• Temps d’analyse : Protocoles rapides généralement complétés en 20–35 minutes à température ambiante ou à 37 °C.
• Stabilité : Réactifs stables pendant plus de 6–12 mois dans les conditions de stockage recommandées.

Applications

• Recherche métabolique : Quantification de l’activité de la GOx pour étudier le métabolisme du glucose et la biologie redox.
• Production enzymatique industrielle : Contrôle qualité de la GOx dans les préparations enzymatiques et les additifs alimentaires.
• Biotechnologie : Suivi de la GOx dans le développement de biocapteurs et les procédés de bioconversion.
• Pharmacologie et découverte de médicaments : Évaluation des effets de composés sur l’activité de la GOx.
• Recherche clinique : Étude de la régulation du glucose et du stress oxydatif dans des modèles de maladies.

Les kits de dosage de la glucose oxydase offrent des outils robustes, sensibles et pratiques pour mesurer l’activité de la GOx, facilitant la recherche sur le métabolisme intermédiaire et les applications enzymatiques. Leurs principes enzymatiques et de détection reflètent fidèlement les processus physiologiques d’oxydation du glucose, permettant des avancées dans la régulation métabolique, la production d’enzymes et les innovations biotechnologiques.