Lattato deidrogenasi (LDH)
La morte cellulare o la citotossicità sono tipicamente valutate quantificando le lesioni della membrana plasmatica. I kit per il dosaggio della citotossicità LDH forniscono un metodo rapido e semplice per quantificare la citotossicità basato sulla misurazione dell'attività della lattato deidrogenasi (LDH) rilasciata dalle cellule danneggiate.
A differenza di molti altri enzimi citoplasmatici presenti in molte cellule, in piccole quantità (ad esempio, fosfatasi alcalina e acida) o instabili, la LDH è un enzima citoplasmatico stabile presente in tutte le cellule e rilasciato rapidamente nel surnatante della coltura cellulare dopo il danneggiamento della membrana plasmatica. L'attività della LDH può essere determinata mediante una reazione enzimatica accoppiata: La LDH ossida il lattato a piruvato che reagisce poi con il sale di tetrazolio INT a formazanata. L'aumento della quantità di formazan prodotto nel surnatante della coltura è direttamente correlato all'aumento del numero di cellule lisate. Il colorante formazan è solubile in acqua e può essere rilevato spettrofotometricamente a 500 nm.
A differenza di molti altri enzimi citoplasmatici presenti in molte cellule, in piccole quantità (ad esempio, fosfatasi alcalina e acida) o instabili, la LDH è un enzima citoplasmatico stabile presente in tutte le cellule e rilasciato rapidamente nel surnatante della coltura cellulare dopo il danneggiamento della membrana plasmatica. L'attività della LDH può essere determinata mediante una reazione enzimatica accoppiata: La LDH ossida il lattato a piruvato che reagisce poi con il sale di tetrazolio INT a formazanata. L'aumento della quantità di formazan prodotto nel surnatante della coltura è direttamente correlato all'aumento del numero di cellule lisate. Il colorante formazan è solubile in acqua e può essere rilevato spettrofotometricamente a 500 nm.
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