Muis polyklonen productie na genetische immunisatie
Met deze techniek kan de muis het gen dat codeert voor het antigeen van interesse in vivo tot expressie brengen.
=> Offerteaanvraag
Het gen bevattende plasmide wordt direct geïnjecteerd in muizen die op die manier het geïnteresseerde antigeen in vivo tot expressie zullen brengen. Le plasmide contenant le gène d'intérêt est directement injecté chez l'animal qui va ensuite exprimer la protéine in vivo.
Van de getransfecteerde cellen zullen de antigeenpresenterende cellen (APC) de gerichte moleculen via MHC aan de actoren van de immuunrespons tonen.
Een deel van deze actoren, B-cellen, produceert specifieke antilichamen.
Standaardprotocol :
- Bouw van de DNA-expressievectorplasmide met een CMV-promotor en versterkers die het antigeen ORF bevatten
- Transfectie van HEK293-cellen met plasmide DNA en bereiding van antigeenextract
- Injectie van plasmide DNA in muizen 3 keer
- Muizen laten bloeden
- Testen van sera op antigeenspecifieke titer met gebruik van eiwitextract (in HEK293) als coatingantigeen
- Als titer niet voldoende is, 1 of 2 andere boosts
- Als de titer voldoende is, wordt de rest van de stappen voor het verzamelen van ascitesvloeistof gevolgd
Belangrijke nummers :
- Minimaal aantal muizen : ...4.....
- Lengte protocol : 100-140........ dagen
- Aantal injecties per dier : 3-5.....
- Hoeveelheid antigeen per injectie : ...20.... µg/muis
- Aantal monsterverzamelingen per dier : 1 - 2.....
Aanverwante diensten beschikbaar :
=> Gen synthese
=> Klonen van genen
=> Peptidesynthese/recombinatieproductie
=> Productie van andere polyklonen
=> Productie van monoklonalen
=> Antilichaam labeling
=> Zuivering van antilichamen
=> Fragmentatie van antilichamen
=> Opvouwen van antilichamen
=> Validatie van antilichamen