Productie van lama-monoklonalen
Lama VHH enkel-domein antilichaambibliotheek bouw en screening diensten
Onze geoptimaliseerde bibliotheekconstructie en screeningsprocessen met faagdisplaytechnologie garanderen succesvolle isolatie van VHH-klonen met hoge affiniteit in korte tijd.
Voordelen van lama VHH enkel-domein antilichamen:
- VHH enkel-domein antilichamen zijn slechts 15kD groot, vergeleken met ongeveer 150kD voor typische immunoglobulinen.
- De kleinere omvang van enkeldomein antilichamen stelt ze in staat om fysiek te passen in epitopen die normaal gesproken niet toegankelijk zijn voor traditionele antilichamen, waaronder de actieve plaats van veel enzymen.
- De kleinere omvang zorgt er ook voor dat ze sneller weefsels kunnen binnendringen en zelfs gemakkelijk de bloed-hersenbarrière kunnen passeren.
- VHH-antilichamen zijn extreem stabiel en bestand tegen zowel hoge zuurtegraad als temperatuur, en kunnen zich na denaturatie zelfs weer opvouwen tot een functioneel eiwit.
- Enkeldomein antilichamen hebben een zeer hoge oplosbaarheid door de verhoogde hydrofobiciteit.
- De kleine omvang en stabiliteit maken de VHH-antilichamen ideale kandidaten voor therapeutische en diagnostische toepassingen.
Details van de productie van VHH enkeldomein antilichaam:
- Lama-immunisatie
- Faag display bibliotheekconstructie: We controleren de anti-serumtiter met ELISA en verzamelen meerdere productiebloedingen en PBMC-cellen gedurende de immunisatie. De PBMC-cellen worden op verschillende tijdstippen bewaard in RNA-lysebuffer, zodat de antilichaamrepertoires tijdens het immunisatieproces bewaard blijven. Aan het einde van het immunisatieprotocol kan de klant de PBMC op elk gewenst tijdstip kiezen om de bibliotheek samen te stellen.
- VHH-bibliotheekscreening en affiniteitsbepaling: De geconstrueerde bibliotheek zal worden gescreend door middel van meerdere rondes van affiniteitsbinding/selectie met antigeen. Positieve klonen zullen geïdentificeerd worden via ELISA. Genen van deze positieve klonen zullen sequentie-analyse ondergaan. De affiniteit van elke binder zal bepaald worden door ELISA. Afhankelijk van de complexiteit van het antigeen zullen één tot drie klonen met de beste affiniteit geleverd worden.
- VHH-antilichaamzuivering op grote schaal: Voor elke positieve kloon leveren we zonder extra kosten ~100ug gezuiverd eiwit. Extra antilichaameiwit is beschikbaar tegen extra kosten.
-Naïeve VHH faag display bibliotheek: Onze nieuwste VHH-bibliotheek van niet-geïmmuniseerde lama's omvat grote en diverse VHH-repertoires die meer dan 2,0x109 perifere mononucleaire cellen van 20 niet-geïmmuniseerde lama's vertegenwoordigen. De bibliotheek heeft meer dan 2x109 onafhankelijke klonen.