Kits ABC (Complexo Avidina/Biotina)

O princípio dos kits de deteção ABC baseia-se na afinidade da avidina (ou estreptavidina) pela biotina. De facto, a abreviatura ABC significa Avidin / Biotin Complex (complexo avidina/biotina).
A avidina é uma glicoproteína básica de 68 kDa presente na clara do ovo e em tecidos de aves, répteis e anfíbios. A avidina tem uma forte afinidade pela biotina, uma vitamina solúvel de 34 kDa. A biotina pode ser ligada a uma grande variedade de moléculas biológicas, como os anticorpos, e várias moléculas de biotina podem ser ligadas a uma proteína. A proteína biotinilada pode então ligar-se a mais do que uma molécula de avidina. Uma desvantagem da avidina é a sua ligação não específica a estruturas de carga negativa, como o núcleo das células. A utilização de estreptavidina reduz consideravelmente esta ligação não específica.
A estreptavidina é isolada do Streptomyces avidinii e é semelhante em tamanho e afinidade à avidina biotina. Mas, ao contrário da avidina, a estreptavidina não é glicosilada, o que torna as proteínas menos susceptíveis de ligação inespecífica em aplicações imunohistoquímicas.
Em geral, os kits de deteção ABC são compostos por
- Um anticorpo secundário biotinilado
- Um complexo avidina/enzima
Os kits podem ou não conter os tampões de bloqueio e de diluição e o substrato, consoante os formatos.