O princípio da cromatografia baseia-se em duas fases: a fase móvel, que transporta a amostra, e a fase estacionária, que permite sua purificação. As resinas cromatográficas constituem essa fase estacionária.
Existem diferentes tipos de cromatografia dependendo da resina utilizada. Os quatro principais tipos de cromatografia incluem cromatografia de afinidade, cromatografia de troca iônica (IEX), cromatografia de interação hidrofóbica (HIC) e cromatografia por exclusão de tamanho (SEC). A maioria dos sistemas de purificação requer o uso de vários desses tipos para alcançar a pureza necessária para aplicações subsequentes. A escolha e a ordem dos métodos mais apropriados são essenciais para otimizar um processo de purificação de proteínas.
Comparação dos Principais Tipos de Cromatografia
Tipo de Cromatografia | Princípio de Separação | Interação | Eluição |
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Afinidade | Interação específica | Sem ligante competitivo | Ligante competitivo (específico), ruptura de interações proteína/proteína por alteração de condições (não específica) |
Troca iônica | Carga superficial líquida | Baixa força iônica | Alta força iônica, aumento (cátions) ou diminuição (ânions) do pH |
Interações hidrofóbicas | Hidrofobicidade | Alta força iônica | Baixa força iônica |
Exclusão por tamanho | Raio hidrodinâmico |