Anticorpos secundários anti-coelho

Os anticorpos secundários anti-coelho são anticorpos usados para detectar e visualizar a presença de anticorpos primários gerados em coelhos. Eles são produzidos imunizando um animal hospedeiro com uma população agrupada de imunoglobulinas (Ig) da espécie alvo, neste caso, coelhos, e depois coletando e purificando os anticorpos resultantes. Os anticorpos secundários anti-coelho estão disponíveis em espécies hospedeiras como cabra, burro, camundongo, galinha e ovelha, e vêm em uma variedade de conjugados, incluindo anticorpos não marcados, conjugados enzimáticos (fosfatase alcalina (AP) ou peroxidase de rábano picante (HRP)), e biotina. Eles também estão disponíveis como IgG completo.

Escolher o anticorpo secundário anti-coelho correto para um experimento depende de vários fatores, incluindo a aplicação, a espécie hospedeira do anticorpo primário, o isotipo do anticorpo secundário, o tipo de conjugado e a pré-adsorção ou adsorção cruzada. Os seguintes passos podem ajudar na seleção do anticorpo correto:

• Determine a espécie hospedeira do anticorpo primário: O anticorpo secundário deve ser gerado contra a espécie hospedeira usada para gerar o anticorpo primário. Por exemplo, se o anticorpo primário for gerado em coelho, deve-se usar um anticorpo secundário anti-coelho gerado em uma espécie diferente de coelho, como cabra, burro ou camundongo.
• Determine o isotipo do anticorpo primário: O anticorpo secundário deve ser direcionado contra a classe/isotipo do anticorpo primário. Por exemplo, se o anticorpo primário for um IgG1 de camundongo, deve-se usar um anticorpo anti-camundongo IgG ou um fragmento F(ab) menos específico de anti-camundongo IgG.
• Escolha o tipo de conjugado: Os anticorpos secundários podem ser marcados com enzimas (peroxidase, fosfatase alcalina), marcados com fluorocromos (FITC, R-PE, Alexa-Fluor®) ou biotinilados. A escolha do tipo de conjugado depende da aplicação.
• Considere a pré-adsorção ou adsorção cruzada: A pré-adsorção ou adsorção cruzada pode ajudar a reduzir a ligação não específica. Por exemplo, se o anticorpo primário for gerado em coelho, pode-se usar um anticorpo secundário anti-coelho que tenha sido pré-adsorvido contra outras espécies, como camundongo ou humano.
• Verifique a compatibilidade com o ensaio: O anticorpo secundário deve ser compatível com o ensaio utilizado, como Western blot ou imuno-histoquímica.